液相ELISA法测定人血浆抗英夫利西单抗抗体及在克罗恩病患者中应用
Measurements of antibodies to infliximab in plasma by solution ELISA and its application in patients of Crohn's disease
目的:建立人血浆抗英夫利西单抗抗体(antibodies to infliximab,ATI)免疫分析方法并进行方法学验证.方法:用甘氨酸酸解英夫利西单抗(infliximab,IFX)与ATI结合形成的复合物,然后用生物素标记IFX和辣根过氧化物酶(HRP)标记IFX结合ATI形成桥联复合物,再将溶液转移到链霉亲和素包被的孔板上进行检测.方法建立后采用51例未曾使用过IFX的克罗恩病患者血浆进行验证.结果:检测ATI的ELISA方法经验证筛选临界值为1.16,确证临界值为17.21%,滴度临界值为1.34,批内和批间精密度均小于20%,灵敏度达50ng·mL-1,当阳性对照抗体质量浓度为100ng·mL-1时,药物耐受水平为12.5μg·mL-1.结论:成功建立并验证了检测人血浆ATI的免疫分析方法,适合临床开展治疗药物检测.
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